细胞称号:LLC 小鼠肺癌细胞 组织起原:肺 培养条款:DMEM +10% FBS 形 态:贴壁;上皮细胞样 背 景:小鼠Lewis肺癌细胞。 LLC细胞提供原代/传代细胞,质地保证,滋长气象邃密,莫得细菌 真菌 支原体等微生物欺凌。细胞一般以T25培养瓶包装,容积75ml细胞数目可达10的6次方把握。购买方收到细胞应当随机查验,如发现细胞气象欠安或者大部分升天情况下,须本日沟通我司。获取我期间阐述后免费补发一株。一周内发现细胞有欺凌情况,请拍照纪录并与销售部沟通。 LLC细胞的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实践室选拔的标准略有各别,然则齐会恪守慢冻速溶的目的。我以为有以下几点需要严防: (1)冻存前细胞气象,细胞最佳在对数滋永远,细胞密度适合,刚刚发生细胞和会伪娘 拳交,过密或连成片的细胞气象不好,况且消化时退却易散布; (2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数目级相比好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(未必10的8次方个细胞)分红两管。 (3)LLC细胞消化和奏乐,切忌胰酶消化过度,奏乐不成太用劲,最佳不要吹出许多泡泡。消化后立即加入彻底培养基奏乐哦,不是加入冻存液再奏乐。 (4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%齐用过,问题不大,个东谈主以为10%-20%不错了,能从简处就从简点嘛!另外,冻存液不错在处分细胞前树立,放在4度雪柜预冷。细胞离心后平直用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。 (5)对于“慢冻”,传统的标准,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80渡过夜,终末液氮。对于条款较好的实践室和细胞冻存数目多的实践室,保举使用设施降温盒,内装异丙醇,在-80度并内不错慢慢降温,很浅陋,省了包棉花、4度、-20度了。
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